El flavonoide natural acacetin actúa sobre LAMTOR1 para potenciar la autofagia y revertir el hígado graso

La disfunción metabólica asociada a la enfermedad del hígado graso (MAFLD, por sus siglas en inglés) afecta a cientos de millones de personas en todo el mundo y puede progresar a esteatohepatitis, cirrosis y carcinoma hepatocelular. A pesar de su enorme carga, no existen terapias aprobadas por la FDA, lo que crea una demanda urgente de nuevas dianas moleculares y agentes terapéuticos. La autofagia —el proceso de reciclaje celular que elimina orgánulos dañados y gotas de lípidos— está deteriorada en la MAFLD, y restaurarla ha surgido como una prometedora estrategia terapéutica.

Este estudio investigó la acacetin (ACA), una 5,7-dihidroxi-4′-metoxiflavona aislada de la menta coreana (<em>Agastache rugosa</em>), en un modelo murino con dieta alta en grasas deficiente en colina y con aminoácidos definidos (CDAHFD), que recapitula rápidamente la patología humana de la MASH. Los ratones tratados con ACA (10 mg/kg i.p. en días alternos durante 4 semanas) mostraron una reducción de las enzimas hepáticas séricas (GOT1/AST disminuyó ~35%; GPT/ALT se redujo significativamente), menor lípido hepático teñido con Oil Red O, una marcada disminución del área fibrótica positiva para el tricrómico de Masson y menor infiltración de macrófagos ADGRE1/F4/80. ACA también elevó VMP1, un marcador temprano de autofagia, en el tejido hepático, y redujo la acumulación de lípidos en adipocitos 3T3-L1 in vitro mediante inducción de autofagia confirmada por ensayos de flujo de LC3.

Para identificar la diana molecular de ACA sin marcaje químico, el equipo combinó la Estabilidad de Diana Responsiva a la Afinidad por Fármacos (DARTS) con proteómica por LC-MS/MS. Entre las proteínas que mostraron protección dependiente de ACA frente a la digestión con pronasa, LAMTOR1 —un andamiaje de membrana lisosomal que ancla el complejo Ragulator/LAMTOR— fue identificado como el principal candidato. El Ensayo de Desplazamiento Térmico Celular (CETSA) y el Ensayo de Ligación por Proximidad (PLA) confirmaron la unión directa de ACA a LAMTOR1 en células intactas. El tratamiento con ACA provocó la disociación de LAMTOR1 respecto a sus compañeros del complejo LAMTOR (LAMTOR2–5) y de las GTPasas RRAGA/B, que son imprescindibles para reclutar MTORC1 en la superficie lisosomal. En consecuencia, la actividad de MTORC1 (evaluada mediante la fosforilación de RPS6KB1/p70S6K y ULK1) fue suprimida, AMPK fue activado y el flujo autofágico aumentó —evidenciado por la acumulación de LC3-II, la degradación de SQSTM1/p62, los cambios en el reportero en tándem mRFP-GFP-LC3, la actividad lisosomal con DQ-BSA y la translocación nuclear de TFEB—. El silenciamiento por siRNA de LAMTOR1 reprodujo todos estos efectos, y ACA no mostró ningún beneficio aditivo sobre el silenciamiento, confirmando una acción sobre la diana prevista.

Funcionalmente, la inducción de autofagia por ACA requirió una función lisosomal intacta: el co-tratamiento con cloroquina bloqueó la eliminación de lípidos. El reequilibrio MTORC1-AMPK también restauró la señalización metabólica deteriorada en el hígado graso. En el modelo CDAHFD, el tratamiento con ACA incrementó el LC3-II hepático y redujo la carga de gotas de lípidos de manera consistente con una lipofagia aumentada. En conjunto, estos datos posicionan el eje LAMTOR1→MTORC1→AMPK→autofagia como una vía terapéutica coherente modulada por ACA.

El estudio destaca por utilizar la identificación de dianas sin marcaje (DARTS-LC-MS/MS) para pasar del fenotipo al mecanismo, y por la validación genética que refuerza el vínculo causal entre la inhibición de LAMTOR1 y el beneficio metabólico. LAMTOR1 emerge como una diana anteriormente subestimada, pero abordable, para el desarrollo de fármacos contra la MAFLD.