Dasatinib e Quercetina Revertem o Envelhecimento Retiniano em Modelo Murino de DMRI Seca

A degeneração macular relacionada à idade (DMRI) seca é a principal causa de perda irreversível da visão central em adultos mais velhos, porém não existem tratamentos modificadores da doença. Suas características marcantes — acúmulo de lipofuscina no epitélio pigmentar da retina (EPR), degeneração do EPR e atrofia dos fotorreceptores — têm sido associadas à senescência celular, mas se a eliminação de células senescentes poderia retardar a progressão da doença ainda não havia sido testada diretamente. Este estudo é o primeiro a avaliar a terapia senolítica de longo prazo com dasatinib e quercetin (D+Q) em um modelo pré-clínico de DMRI seca, fornecendo uma estrutura mecanística que conecta a senescência do EPR, a disfunção lisossomal e a toxicidade da lipofuscina.

O estudo utilizou camundongos duplo-nocaute Abca4−/−Rdh8−/− com fundo genético C57BL/6J — um modelo estabelecido de DMRI seca no qual proteínas do ciclo visual alteradas causam acúmulo progressivo de lipofuscina e degeneração retiniana. A partir dos 4 meses de idade, os camundongos receberam gavagem oral de 5 mg/kg de dasatinib mais 50 mg/kg de quercetin em três dias consecutivos a cada duas semanas por 4 meses (os controles receberam veículo com PEG400 a 30%). Todos os animais foram avaliados aos 8 meses. A relevância humana foi estabelecida pela análise do conjunto de dados GEO GSE29801, composto por RNA-seq em massa do EPR de pacientes com atrofia geográfica versus controles pareados por idade, utilizando GSEA e análise de expressão diferencial.

Na análise transcriptômica humana, o EPR de pacientes com atrofia geográfica apresentou regulação positiva significativa de fatores do SASP (interleucinas, quimiocinas, MMPs) e dos marcadores de senescência CDKN1A e CDKN2A. O GSEA confirmou o enriquecimento de conjuntos de genes de senescência: o conjunto SAL_SEN_MAYO atingiu escore de enriquecimento normalizado (NES) de 2,07 (FDR q<0,001) e DEMAGALHAES_AGING_UP alcançou NES de 1,46 (FDR q=0,04). Conjuntos de genes relacionados à acidificação lisossomal e vias de resposta ao estresse oxidativo também foram significativamente regulados negativamente no EPR com atrofia geográfica, estabelecendo um contexto humano da doença para a intervenção em camundongos.

No modelo murino, camundongos Abca4−/−Rdh8−/− não tratados com 8 meses de idade apresentaram senescência robusta do EPR, confirmada por elevada atividade de SA-β-galactosidase, aumento na expressão proteica de p16 e p21 e regulação positiva de citocinas do SASP. O pH lisossomal estava significativamente elevado (alcalinizado) em comparação aos controles do tipo selvagem, e a autofluorescência da lipofuscina em preparações planas do EPR estava acentuadamente aumentada. Os marcadores de estresse oxidativo — incluindo capacidade antioxidante total reduzida, razão GSH/GSSG diminuída e elevação de carbonilas proteicas — estavam todos significativamente piores. A análise estrutural por coloração H&E mostrou adelgaçamento da camada nuclear externa (ONL) dos fotorreceptores, e a microscopia eletrônica de transmissão revelou danos ultraestruturais no EPR. A eletrorretinografia (ERG) demonstrou redução das amplitudes das ondas a escotópica, b e c, além de respostas fotópicas diminuídas, indicando perda funcional da visão.

O tratamento prolongado com D+Q reverteu significativamente essas alterações patológicas. Os camundongos tratados apresentaram redução na coloração para SA-β-Gal, menor expressão de p16/p21 e supressão dos níveis de citocinas do SASP no EPR. O pH lisossomal foi restaurado em direção ao normal, a autofluorescência da lipofuscina foi substancialmente reduzida, e a integridade das junções oclusivas ZO-1 na monocamada do EPR foi melhor preservada. A capacidade antioxidante melhorou, as razões GSH/GSSG se recuperaram e a carbonilação proteica diminuiu. Estruturalmente, a espessura da ONL foi melhor mantida, e as amplitudes do ERG foram significativamente maiores nos camundongos tratados com D+Q em comparação aos controles com veículo. Esses achados demonstram coletivamente que a eliminação senolítica de células senescentes do EPR interrompe uma cascata patológica que conecta senescência → disfunção lisossomal → acúmulo de lipofuscina → estresse oxidativo → degeneração retiniana.

As implicações translacionais são relevantes. O dasatinib já é aprovado pela FDA (para leucemia) e o quercetin está amplamente disponível como suplemento, e o regime de dosagem intermitente utilizado aqui (3 dias em uso, 11 dias de pausa, a cada 2 semanas) espelha protocolos já sendo testados em ensaios clínicos humanos para outras condições relacionadas ao envelhecimento. Este estudo fornece a primeira evidência pré-clínica direta de que essa combinação pode retardar a progressão da DMRI seca, abrindo uma potencial via terapêutica para uma doença sem opções modificadoras atualmente disponíveis. As limitações incluem os dados de intervenção baseados exclusivamente em camundongos e a ausência de otimização de dose ou perfil de segurança específico para tecidos oculares.