Novo Anticorpo Humanizado Rompe o Ciclo Inflamatório da Sepse na Origem

Sepse mata milhões anualmente ao desencadear uma resposta imune desregulada que leva a tempestades de citocinas, falência de órgãos e morte. Um fator central, ainda pouco explorado, é a histona H3 citrulinada (CitH3), uma proteína nuclear modificada liberada quando neutrófilos formam armadilhas extracelulares (NETose). A CitH3 elevada perpetua a inflamação ao amplificar tanto a NETose quanto a piroptose de macrófagos, mas até então nenhuma terapia baseada em anticorpos clinicamente viável havia sido desenvolvida para neutralizá-la de forma abrangente.

Este estudo descreve o desenvolvimento sistemático de um anticorpo monoclonal anti-CitH3 humanizado (hCitH3-mAb), criado a partir de um precursor murino existente por meio de humanização de anticorpos assistida por IA. O anticorpo foi otimizado para alta afinidade e especificidade em resíduos citrulinados nas posições R2, R8, R17 e R26 da histona H3 — sítios alvos das enzimas PAD2 e PAD4 — e foi produzido em escala em células CHO com pureza superior a 99,5%. A cinética de ligação confirmou afinidade nanomolar, validando a estratégia de humanização.

Em modelos murinos de sepse com desafio por LPS e infecção por <i>Pseudomonas aeruginosa</i> viva, o hCitH3-mAb reduziu significativamente a produção de citocinas pró-inflamatórias, diminuiu as taxas de mortalidade e atenuou a lesão pulmonar aguda. Notavelmente, o anticorpo aumentou a fagocitose bacteriana nos pulmões, baço e fígado, sugerindo que ele restaura a função imune em vez de suprimi-la globalmente. Uma plataforma inovadora de ELISA digital em pré-equilíbrio (PEdELISA) foi utilizada para detectar concentrações ultrabaixas de CitH3 no plasma, permitindo a identificação de uma janela terapêutica ideal para a intervenção com o anticorpo.

Uma descoberta mecanística central é o ciclo de retroalimentação CitH3–PAD2. A CitH3 liberada no espaço extracelular ativa o receptor Toll-like 2 (TLR2) em macrófagos, desencadeando a liberação intracelular de cálcio. Esse aumento de cálcio promove a auto-citrulinação da PAD2 e sua translocação do citosol para o núcleo, onde ela citruliniza a histona H3 para produzir mais CitH3 — completando um ciclo vicioso de amplificação. O hCitH3-mAb interrompe esse ciclo na etapa extracelular, prevenindo efetivamente a ativação downstream do TLR2 e restaurando a homeostase dos macrófagos.

Esses achados estabelecem o hCitH3-mAb tanto como uma ferramenta mecanística quanto como um promissor candidato terapêutico para sepse e, potencialmente, para outras doenças inflamatórias mediadas pelo sistema imune. As ressalvas incluem a natureza pré-clínica dos dados e a necessidade de validação em ensaios clínicos humanos, especialmente no que diz respeito às janelas de dosagem ideais e aos efeitos fora do alvo em populações de pacientes diversas.