Zirkuläre RNA-Telomerase übertrifft mRNA bei der Umkehrung beschleunigten Alterns in Progerie-Zellen

**Warum das wichtig ist** Die kardiovaskuläre Alterung ist der führende Treiber von Herzinfarkt und Schlaganfall, und das Hutchinson-Gilford-Progerie-Syndrom (HGPS) verdichtet Jahrzehnte vaskulärer Alterung in die Kindheit. Das Verständnis, wie man endotheliale Seneszenz in diesem extremen Modell umkehren kann, hat direkte Implikationen für die normale Alterung. Frühere Arbeiten zeigten, dass eine transiente Transfektion mit linearer mRNA, die die Telomerase-Reverse-Transkriptase (TERT) kodiert, HGPS-Endothelzellen teilweise retten konnte, doch mRNA ist kurzlebig, was ihre Dauerhaftigkeit begrenzt. Zirkuläre RNA, der die freien Enden fehlen, die Exonukleasen angreifen, hält theoretisch länger und produziert Protein über ein erweitertes Zeitfenster.

**Was untersucht wurde** Das Team generierte Endothelzellen (ECs) aus iPSCs von HGPS-Patienten und verglich sie mit Kontroll-ECs von genetisch normalen Elternteilen. Sie transfizierten HGPS-ECs einmalig mit äquimolaren Mengen Wildtyp-TERT mRNA, katalytisch inaktiver (CI) TERT mRNA oder TERT circRNA (1 µg/3–4×10⁵ Zellen) und verfolgten die Ergebnisse von 3 bis 28 Tage nach der Transfektion. Die Endpunkte umfassten Morphologie, Angiogenese, LDL-Aufnahme, Stickstoffmonoxid-Produktion, Telomerlänge (q-FISH), SA-β-Galaktosidase-Färbung, Kernmorphologie, Genexpression von Seneszenz-/Entzündungsmarkern, DNA-Schäden (γH2AX) und Mitochondriengesundheit (ROS, Membranpotenzial).

**wichtigste Erkenntnisse** Bei jedem Endpunkt war TERT circRNA der linearen TERT mRNA überlegen. Morphologisch waren mit circRNA behandelte HGPS-ECs elongierter und kleiner in der Fläche und ähnelten gesunden Kontrollen. SA-β-Galaktosidase-positive Zellen wurden durch circRNA im Vergleich zu einer geringeren Reduktion durch mRNA etwa 3-fach reduziert, und 28 Tage nach der Transfektion hielten mit circRNA behandelte Zellen niedrige β-Gal-Spiegel aufrecht, während mit mRNA behandelte Zellen in Richtung unbehandelter HGPS-Spiegel zurückgekehrt waren. Die Telomerverlängerung, bestätigt durch q-FISH, war mit circRNA ebenfalls größer und dauerhafter. Seneszenzgene p16 und p21, das krankheitsspezifische Protein Progerin sowie die Entzündungszytokine IL-1β, IL-6, IL-8 und MCP-1 wurden durch circRNA alle deutlich stärker reduziert. Stickstoffmonoxid-Produktion, acetylierte LDL-Aufnahme und Matrigel-Netzwerkformation (Segmente, Hauptsegmente, Schlauchlänge) wurden auf nahezu normale Werte wiederhergestellt. Mitochondrialer ROS wurde reduziert und das Membranpotenzial durch circRNA effektiver normalisiert. Katalytisch inaktive TERT zeigte keinen Nutzen, was bestätigt, dass enzymatische Telomeraseaktivität – nicht bloße RNA-Präsenz – diese Effekte antreibt.

**Implikationen** Diese Studie positioniert TERT circRNA als potenziell transformative RNA-Therapeutika für vaskuläre Alterung. Eine Einzeldosis, die wochenlangen Nutzen bietet, verbessert ein Regime, das wiederholte mRNA-Injektionen erfordert, erheblich. Über HGPS hinaus könnte der Ansatz theoretisch auf normale altersbedingte endotheliale Dysfunktion und Herz-Kreislauf-Erkrankungen angewendet werden. Dies ist auch die erste berichtete kardiovaskuläre und anti-seneszente Anwendung therapeutischer zirkulärer RNA.

**Vorbehalte** Alle Experimente wurden in vitro unter Verwendung von iPSC-abgeleiteten Zellen durchgeführt. Ob circRNA die In-vivo-Verabreichung überlebt und ohne Immunaktivierung ausreichende Gewebekonzentrationen erreicht, muss noch geklärt werden. Das 28-Tage-Fenster ist zwar ermutigend, lässt jedoch offen, ob eine Einzeldosis therapeutisch ausreichend wäre oder wie häufig eine erneute Dosierung erforderlich wäre.