Un nouvel anticorps humanisé brise le cycle inflammatoire de la sepsis à sa source

Chaque année, le sepsis tue des millions de personnes en déclenchant une réponse immunitaire dérégulée qui conduit à des tempêtes de cytokines, à une défaillance multiviscérale et à la mort. Un mécanisme central mais insuffisamment exploré est l'histone H3 citrullinée (CitH3), une protéine nucléaire modifiée libérée lorsque les neutrophiles forment des pièges extracellulaires (NETose). L'élévation du CitH3 entretient l'inflammation en amplifiant à la fois la NETose et la pyroptose des macrophages, mais aucune thérapie à base d'anticorps cliniquement viable n'avait encore été conçue pour le neutraliser de façon large.

Cette étude décrit le développement systématique d'un anticorps monoclonal anti-CitH3 humanisé (hCitH3-mAb), mis au point à partir d'un précurseur murin existant grâce à une humanisation d'anticorps assistée par intelligence artificielle. L'anticorps a été optimisé pour une haute affinité et une haute spécificité envers les résidus citrullinés aux positions R2, R8, R17 et R26 de l'histone H3 — des sites ciblés à la fois par les enzymes PAD2 et PAD4 — et a été produit à grande échelle dans des cellules CHO avec une pureté >99,5 %. La cinétique de liaison a confirmé une affinité nanomolaire, validant ainsi la stratégie d'humanisation.

Dans des modèles murins de sepsis par stimulation au LPS et par infection à <em>Pseudomonas aeruginosa</em> vivant, le hCitH3-mAb a significativement réduit la production de cytokines pro-inflammatoires, abaissé les taux de mortalité et atténué les lésions pulmonaires aiguës. Fait notable, l'anticorps a amélioré la phagocytose bactérienne dans les poumons, la rate et le foie, ce qui suggère qu'il restaure la fonction immunitaire plutôt qu'il ne la supprime de façon globale. Une nouvelle plateforme de digital ELISA en pré-équilibre (PEdELISA) a été utilisée pour détecter des concentrations ultra-faibles de CitH3 dans le plasma, permettant d'identifier une fenêtre thérapeutique optimale pour l'intervention par anticorps.

Une découverte mécanistique majeure est la boucle de rétroaction CitH3–PAD2. Le CitH3 libéré dans le milieu extracellulaire active le récepteur Toll-like 2 (TLR2) des macrophages, déclenchant une libération de calcium intracellulaire. Cette élévation calcique induit l'auto-citrullination de PAD2 et sa translocation du cytosol vers le noyau, où il citrulline l'histone H3 pour produire davantage de CitH3 — complétant ainsi un cycle d'amplification vicieux. Le hCitH3-mAb interrompt cette boucle à l'étape extracellulaire, empêchant efficacement l'activation en aval de TLR2 et rétablissant l'homéostasie des macrophages.

Ces résultats établissent le hCitH3-mAb à la fois comme outil mécanistique et comme candidat thérapeutique prometteur pour le sepsis, et potentiellement pour d'autres maladies inflammatoires à médiation immunitaire. Parmi les limites à noter figurent la nature préclinique des données et la nécessité d'une validation clinique chez l'humain, notamment en ce qui concerne les fenêtres de dosage optimales et les effets hors cible dans des populations de patients diversifiées.